丁香园 hbchendl 网友提供的非常优秀的Image-Pro Plus（IPP）动画教程的这一章节找不到了（也许根本就没有这一段，是我记错了）。于是就自己摸索，折腾出这个办法，有些笨。留在这儿备查。有兴趣的朋友欢迎交流。
适用：基于化学发光原理的条带（如Western）和芯片（如抗体芯片）分析，当然PCR的电泳条带也可以。
1. 软件设置：Measure – Calibration - Intensity，New一个新的，选择Std. Optical Density，点击System按钮，设置为系统默认。简单说，就是点越黑，数值越高。Close关闭窗口。 
2. 选择需要测量的指标，包括面积和光密度：Measure - Count/Size，在弹出窗口Count / Size中选择Measure - Select Measurements，加入Area（默认已经添加）和IOD（“综合光密度”，包括了面积和光强度信息），OK关闭窗口；关闭Count / Size窗口。 
3. 打开图片，使用工具栏的方框、圆形或者不规则图标圈取感兴趣的区域（ROI），这里用圆形框选一个。注意不要把整个点覆盖到。为什么这样，不多解释。 
4. 点击工具栏Count and measure objects
图标，再次弹出Count / Size窗口，点击“Select Range…”按钮，弹出Segmentation窗口，将测量范围选择所有（两条红色竖线分别置于0和65535两个顶端），此时图片应该全部被红色覆盖（Class color）。Close关闭窗口。 
5. 回到Count / Size窗口，点击Count按钮计数，此时在ROI内会有1（测量的区域数目）并且标志红色框（测量区域）。菜单View – Statistics，获得Sum一栏的Area和IOD值，记下来（有能力可以Export Data到Excel文档，这里不详述）。
6. 测量另一个同等大小ROI的灰度值：关闭Statistics窗口，将ROI鼠标点击移动到另一个区域（鼠标指针变为十字形时，按下左键拖动到另一个区域，放下鼠标左键即可，1和红色框还留在原处，不需要管它），再次点击Count，然后View – Statistics，读取这个区域的Area和IOD的Sum值。如果保持ROI大小不变，Area值应该都一样大。
7. 每个ROI的平均光密度计算：IOD/Area。
